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ren白介su1受tiII(IL-1R2)白介su试剂盒

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名称: ren白介su1受tiII(IL-1R2)白介su试剂盒
型号: IL-1R2
展shang: ELISA试剂盒
文dang: wu相关文dang

简单介绍

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ren白介su1受tiII(IL-1R2)白介su试剂盒  的详细介绍


ren白介su1受tiII(IL-1R2)试剂盒

shi用说明书

ren白介su1受tiII(IL-1R2)试剂盒ji本yuan理:

采用shuang夹心ELISAfa。用kangrenIL-1R2bao被yu酶标板shang,实验时样品或标准品中的renIL-1R2与bao被结he,游离的成穤hi粁i去。依次加入生物su化的kangrenIL-1R2和la根过氧化物酶标记的亲和su。kangrenIL-1R2与结he在bao被shang的renIL-1R2结he、生物su与亲和sute异xing结he而形成**复he物,游离的成穤hi粁i去。加入显se底物(TMB),TMB在la根过氧化物酶的催化下呈现lanse,加终止液后变成黄se。用酶标仪在450nm波长处测OD值,renIL-1R2nong度与OD450值之间呈正比,通过绘zhi标准曲xian计suan出样品中renIL-1R2的nong度。

ren白介su1受tiII(IL-1R2)试剂盒miao述:

英文名称 Human IL-1R2 (Interleukin 1 Receptor Type II) ELISA Kit
中文名称 ren白介su1受tiII(IL-1R2)酶联**吸附测定试剂盒
huo号 X-EL-H0090c 种shu Human/ren
规ge 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测方fa shuang夹心fa
检测范围 31.25~2000pg/mL 灵min度 18.75pg/mL

ren白介su1受tiII(IL-1R2)白介su试剂盒组成:

中文名称

英文名称

规ge

bao存

  ELISA酶标板(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标准品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准品&样品稀释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

nong缩生物su化

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生物su化稀释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nong缩HRP酶结he物

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避光)

酶结he物稀释液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nong缩xi祔ou海?/span>25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

fan应终止液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板覆mo

Plate Sealer

  5/3 *

 

说明书

Product  Description

  1 

 

质检报告

Certificate of Analysis

  1 

 

ren白介su1受tiII(IL-1R2)白介su试剂盒te别说明
*: [96T/48T](打开bao装后请及时检查所有物品shifu齐全完整)
#: 一周内shi用可存yu4℃,需长时间存放或多次shi用jianyi存yu-20.                                      

ren白介su1受tiII(IL-1R2)试剂盒检测前准备工zuo:

1. 请ti前20分zhong从冰xiang中取出试剂盒,平heng至室温。

2. 将nong缩xi祔ou河胹huang蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰xiang中取出的nong缩xi祔ou嚎赡苡薪峋В瑂huyu正常现象,可用40℃水浴微加热shi结晶完全溶解后再peizhixi祔ou海尤任露萣u要超过50℃,shi用时xi祔ou河ξ椅拢angrishi用。

3. 标准品yu10000×g离心1分zhong,加入标准品&样品稀释液1.0mL至冻干标准品中,旋jin管盖,静置10分zhong,shang下颠倒shu次,待其充分溶解后,用yi液器将其轻轻混匀(nong度为8000pg/mL)。ran后根据需要jin行倍比稀释(注:bu要zhijie在fan应孔中jin行倍比稀释)。jianyipeizhi成yi下nong度:an照稀释方fa图例 标准品&样品稀释液zhijiezuo为kong白孔0ng/mL。如peizhi5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mL的shang述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释液的EP管中,混匀ji可,其余nong度依此类推。 

4. 生物su化工zuo液:实验前计suandang次实验所需用量(yi100μL/孔计),实际peizhi时应多peizhi100-200μL。shi用前15分zhong,yi生物su化稀释襤e∈蚽ong缩生物su化(1:100)成工zuonong度。dangrishi用。

5. 酶结he物工zuo液:实验前计suandang次实验所需用量(yi100μL/孔计),实际peizhi时应多peizhi100-200μL。shi用前15分zhong,yi酶结he物稀释襤e∈蚽ong缩HRP酶结he物(1:100)成工zuonong度。

dangrishi用。

ren白介su1受tiII(IL-1R2)试剂盒标准品稀释方fa图例:(yi500μL/管为例,也可根据实际用量来稀释,如200μL/管)

            

1. 在各孔中加入标准品或样品各100μL 37℃孵育90分zhong

2. 加入100μ生物su化工zuo液,37℃孵育60分zhong

3. xi涤3

4. 加入100μL酶结he物工zuo液, 37℃孵育30分zhong

5. xi涤5

6. 加入90μL底物溶液, 37℃孵育15分zhongzuoyou

7. 加入50μL终止液,立ji在450nm波长处测量OD

8. 结果计suan

一、操zuoyinsu对ELISA结果的影响ELISA操zuo步zhou复杂,操zuobudang将引起絰i蟮奈蟛睢i下叙述各ge步zhou中的影响yinsu。

1.加样

2.温育

3.xi涤

4.显se

5.比se

er、灰区的设置通常情况下,ELISA定xing实验yi“阳xing”和“阴xing”来报告结果,两zhe间有一条分界xian被称为“阳xing判断值ao?/span>cut-off valueCO值),这shi定xing**测定结果报告的依据。

三、标本复查ELISA手工检测过程复杂,影响yinsu较多,jishi室内质控在控,也可能yin孔间差异而造成结果的差异,yin此加大复查力度shibao证结果譲i穢ing的可kao方fa,比如对HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等项目的可疑、ruo阳xing标本及少见mo式的检测结果jin行复查。

四、结果判断和报告常用下列几种方fa表示结果:

1.定xing测定

2.半定量测定 结果襤ua銀i滴度表示。

3.定量测定 ji用yizhi量的标准品zuo一系列稀释后jin行ELISA测定,绘zhi标准曲xian,结果yi优liang量或单位表示。在ELISA定量检测中每一块fan应板du必须绘zhi相应的标准曲xian。

白介su试剂盒注yi事项:

仔细yue读说明书。

检查试剂盒标签shang的有xiao期。如果超过有xiao期,请勿shi用。

an说明书确定所有试剂齐全(shu量、ti积)。

标本zhi备要规范,每份标本ti积要an2-3ge复孔yishang的量zhi备(zhu存),尽量分装做备份。短期内wufa实验zhe,注yi低温bao存。

准备好所有实验额外所需物品,(比如yi液器,试管,清xi器,酶标仪)。

an说明书将所用试剂平heng至室温,根据检测标本shu量确定所需试剂的量。

检查试剂盒内每种试剂的zhu存条件,bao证所有试剂均an照试剂盒内说明书推荐的条件存储。

检查bu稳定或zhe变质的试剂溶液(比如沉淀或变se)。有些试剂,比如标准品稀释液或zhe检测稀释液,可能在设计时就含有沉淀物。所有试剂在滴入酶标板之前,必需充分混匀。而由yu沉淀物的texing,在加入酶标板之前,必需bu停搅拌。

bao证充分的孵育时间和温度。

切勿shi用bu同生产批号的试剂取代蟴hong惺约粱蚧靐e蟴hong惺约痢Ⅻ/span>

在混he或溶解蛋白溶液蔮ao苊馀輒o产生。

在实验开始之前,an排好实验liu程。

在实验开始之前,清洁工zuo台。

ruo有问ti,应与我公si或代理shang的技术支chi联系

ren白介su1受tiII(IL-1R2)试剂盒结果判断:

1. 每ge标准品的OD值减去kong白孔的OD值后zuo图,如设置复孔,则应取其平均值计suan。yi标准品的nong度为heng坐标,OD值为纵坐标,绘出标准曲xian。亦可yiOD值为heng坐标,标准品的nong度为纵坐标,绘出标准曲xian。

2. 推荐shi用专襠ang那鷛ianzhizuoruan件,如curve expert 1.31.4,在ruan件界面ji可根据样品OD值,由标准曲xian查出相应的nong度,chengyi稀释倍shu;亦可将样品的OD值代入标准曲xian的拟he方程式,计suan出样品nong度,再chengyi稀释倍shu,ji为样品的实际nong度。

3. ruo样品OD值高yu标准曲xianshang限,应适dang稀释后重测,计suannong度时应chengyi稀释倍shu。 

ren白介su1受tiII(IL-1R2)试剂盒有xiao期稳定xing考察

本试验yi白介su1受tiII(IL-1R2)为例

1.  OD值:

正常bao存条件下有xiao期内和超过有xiao期2geyue所测OD謉ang冉吸/span>

正常有xiao期内OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2geyue有xiao期OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收率:穤hi饄u定值xue清及xuejiang中加入襤uan康命/span>白介su1受tiII(IL-1R2)标准品,重复测定并计suan其品均值,回收率为测定值与理论謉ang谋嚷省Ⅻ/span>

        正常bao存条件下有xiao期内和过有xiao期2geyueelisa 试剂盒回收率检测结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. xianxing:穤hi饄u定值xue清及xuejiang中加入襤uan康命/span>白介su1受tiII(IL-1R2)标准品,并将标本an1:2,1:4,1:8稀释,xianxing范围ji为稀释后样本中白介su1受tiII(IL-1R2)含量的测定值与理论謉ang谋嚷省Ⅻ/span>

         正常bao存条件下有xiao期内和过有xiao期2geyueelisa 试剂盒回xianxing检测结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  jing密度:yi样品测定謉ang谋湟煜祍huCV表示。CV%=SD/meanx100

批内差:取同一批次试剂盒对低值,中值和高值样本jin行定量检测,每份样本测定20次,穤hi鸺苨uanbu同nong度样本的平均值和SD值。

批间差:选取 3 gebu同批次的试剂盒穤hi鸲缘汀⒅小⒏咧刀ㄖ笛緅in行定量测定, 每ge样本shi用同一试剂盒重复测定 8 次,穤hi鸺苨uanbu同nong度样本的平均值及 SD 值。(批内差: CV<10%;批间差: CV<11%)

       正常bao存条件下有xiao期内和过有xiao期2geyueelisa 试剂盒回jing密度检测结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

ren白介su1受tiII(IL-1R2)试剂盒会出现的问ti及解决办fa:

1. 加入fan应终止液后,没有吸光值或吸光值偏低。

a.yuanyin:未加入酶标记物。

解决办fa:请an照操zuo步zhoujin行。

b.yuanyin:试剂盒内容物未能充分回。

解决办fa:确定试剂盒内容物回温后再jin行操zuo。

c.yuanyin:室温太低。

解决办fa:ruo室温太低(<19),请yu操zuo步zhou4,适dang延长温育时间。

d.yuanyin:未shi用试剂盒的清xi液清xi。

解决办fa: 请用试剂盒内所ti供的清xi液清xi。

e.yuanyin:试剂盒yi过有xiao期限。

解决办fa:请更换成仍在有xiao期限内的试剂盒。

2. 标准曲xianxianxingbu佳,或shi平行xingbu好。

a.yuanyin:温育位置避光bu好或受dao气liu干rao。

解决办fa: 请确认温育位置jibu透光也bu透风(如chou屉内)

b.yuanyin:操zuo时间tuo太久。

解决办fa:请在方fa熟lian后再jin行操zuo。

c.yuanyin:微孔间相互wuran。

解决办fa: 加样品蔮ao胄⌒奈鸾Τ鑫⒖淄猓瑈i免造成其它微孔的wuran。

d.yuanyin:标准品或酶标记物所加入的量bu一致。

解决办fa:请shi用yi校正过的yi液枪,并确bao其与吸头之间有高度密hexing。

e.yuanyin:tian加样品或试剂的操zuo方fabu正确。

解决办fa:加样品或试剂蔮ao非胛餵ie触微孔。

f.yuanyine窗骞蘤a生问ti(如管路堵塞、xi完板后未立kejin行下一步zhou)

解决办fa:请随时监控xi板jixi板过程,xi完后立jijin行下一步zhou。

3. 吸光值均偏高(或xianxingbu够dou)

a.yuanyin:室温太高(>25)

解决办fa: ruowufa絛ang褪夷谖露龋胧蔰ang缩短步zhou4的温育时间。

b.yuanyin:底物溶液受daowuran。

解决办fa: ruofa现底物溶液yi呈现淡lanse,请bu要再shi用。

c.yuanyin:fan应时间超过太久。

解决办fa:请控zhifan应时间。

d.yuanyin:酶标记物wuran了盒内其它试剂。

解决办fa:shi用过的吸头应立ji丢弃,可避免试糽iang湎嗷uran,凡shi试剂(te别shi酶标记物与底物溶液)jie触过的容器应立ji清xi干净。(先yipiao白水浸泡,再yi清水冲xi干净,可确baowu残留)

4. 阴xing标准品的吸光謉ang蛓u阳xing标准品的吸光值。

a.yuanyin:微孔中的试剂未能充分混he。

解决办fa: 试糽iang油旰螅枨醧iao盘四周shi其充分混he均匀。

b.yuanyine窗骞蘤a生问ti(2-f.)

解决办fa:请参考2-f.

c.yuanyin:tian加样品或酶标记物的量bu一致。

解决办fa: 请参考2-d.

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