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ATCCxibao 人成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)试剂盒

如guonin对该感xing趣的话,可以
名chen: ATCCxibao 人成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)试剂盒
型号: FGF7
展商: ELISA试剂盒
文dang: 无相关文dang

简单介绍

ATCCxibao 人成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)试剂盒采用双夹心ELISA法。觤ei谷薋GF7包bei于酶标板上,实yan时yangpin或标准pin中的人FGF7yu包bei结合,you离的成分bei洗去。依次jia入sheng物素化祄u谷薋GF7和辣gen过yang化物酶标记的亲和素。抗人FGF7yu结合在包bei上的人FGF7结簒iheng物素yu亲和素特异xing结合而形成**复合物,you离的成分bei洗去。jia入显色底物(TMB),TMB在辣gen过yang化物酶的催化下呈现蓝色,jia终zhiyehoubian成黄色。用酶标yi在450nm波长处ceOD值,人成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)试剂盒浓度yuOD450值之jian呈正比,通过绘制标准曲线计算出yangpin中人FGF7的浓秖uⅫ/h2>


ATCCxibao 人成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)试剂盒  的详蟜u樯埸/font>


ATCCxibao 人成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)试剂盒

使用说mingshu

成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)试剂盒基本原li:

采用双夹心ELISA法。觤ei谷薋GF7包bei于酶标板上,实yan时yangpin或标准pin中的人FGF7yu包bei结合,you离的成分bei洗去。依次jia入sheng物素化祄u谷薋GF7和辣gen过yang化物酶标记的亲和素。抗人FGF7yu结合在包bei上的人FGF7结簒iheng物素yu亲和素特异xing结合而形成**复合物,you离的成分bei洗去。jia入显色底物(TMB),TMB在辣gen过yang化物酶的催化下呈现蓝色,jia终zhiyehoubian成黄色。用酶标yi在450nm波长处ceOD值,人FGF7浓度yuOD450值之jian呈正比,通过绘制标准曲线计算出yangpin中人FGF7的浓秖u

ATCCxibao 人成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)试剂盒描述:

英文名chen Human FGF7 (Fibroblast Growth Factor 7) ELISA Kit
中文名chen 人成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)酶联**吸fuceding试剂盒
huo号 X-EL-H0092c 种属 Human/人
gui格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检ce方法 双夹心法
检cefan围 31.25~2000pg/mL ling敏度 18.75pg/mL

ATCCxibao 人成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)试剂盒zu成:

中文名chen

英文名chen

gui格

保存

  ELISA酶标板(可chai卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻gan标准pin

Reference Standard

  2/1 zhi*

4/-20 #

标准pin&yangpinxi释ye

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓缩sheng物素化

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1zhi 120μL/70μL*

4/-20 #

sheng物素化xi释ye

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩HRP胒u岷衔铧/span>

Concentrated HRP Conjugate

  1zhi 120μL/70μL*

4(避光)

胒u岷衔飜i释ye

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩洗涤ye(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶ye(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

穋ongχ誾hiye

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板fu膜

Plate Sealer

  5/3 zhang*

 

说mingshu

Product  Description

  1 

 

质检报告

Certificate of Analysis

  1 

 

特bie说ming
*: [96T/48T](da开包装hou请及时检cha所有物pin是否齐全完整)
#: 一周内使觤ei纱嬗冱/span>4℃,需长时jian存放或多次使用建议存于-20.                                      

成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)试剂盒检ce前准备工作:

1. 请ti前20分钟cong冰箱中qu出试剂簒iao胶庵羢hi温。

2. 将浓缩洗涤ye用双zheng水xi释(1:25)。蝐ong猛甑姆呕?/span>4℃。cong冰箱中qu出的浓缩洗涤ye可能有结晶,属于正常现象,可用40℃水浴微jiare使结晶完全溶解hou再配制洗涤ye(jiare温度瞙ui猚hao过50℃,使用时洗涤ye应为shi温)。dang日使用。

3. 标准pin10000×g离心1分钟,jia入标准pin&yangpinxi释ye1.0mL至冻gan标准pin謝iao瑇uan紧guangai,静置10分钟,上下颠dao数次,待qi充分溶解hou,用移ye器将qiqingqinghun匀(浓度为8000pg/mL)。然hougen据需要进行倍比xi释(注:瞙ui苯釉诜congong中进行倍比xi释)。建议配制成以下浓度:按照xi释方法图例 标准pin&yangpinxi释ye直接作为空白kong0ng/mL。如配制5ng/mL标准pin:qu0.5mL10ng/mL的上述标准pinjia入含有0.5mL标准pin&yangpinxi释ye的EPguan謝iao琱un匀即可,qi余浓度依此类tui。 

4. sheng物素化工作ye:实yan前计算dang次实yan所需用量(以100μL/kong计),实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟,以sheng物素化xi释yexi释浓缩sheng物素化(1:100)成工作浓秖uang日使用。

5. 胒u岷衔锕ぷ鱵e:实yan前计算dang次实yan所需用量(以100μL/kong计),实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟,以胒u岷衔飜i释yexi释浓缩HRP胒u岷衔铧/span>(1:100)成工作浓秖uⅫ/span>

dang日使用。

成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)试剂盒标准pinxi释方法图例:(以500μL/guan为例,ye可gen据实际用量来xi释,如200μL/guan)

            

1. 在gekong中jia入标准pin或yangpinge100μL 37℃孵育90分钟

2. jia入100μsheng物素化工作ye,37℃孵育60分钟

3. 洗涤3

4. jia入100μL胒u岷衔锕ぷ鱵e, 37℃孵育30分钟

5. 洗涤5

6. jia入90μL底物溶ye, 37℃孵育15分钟左右

7. jia入50μL终zhiye,立即在450nm波长处ce量OD

8. 结guo计算

一、操作因素对ELISA结guo的yingxiangELISA操作步骤复杂,操作不dang将yin起较大的误差。以下叙述ge个步骤中的yingxiang因素。

1.jiayang

2.温育

3.洗涤

4.显色

5.比色

二、hui区的设置通常情况下,ELISAdingxing实yan以“阳xing”和“yinxing”来报告结guo,两者jian有一tiao分界线beichen为“阳xing判断值”(cut-off valueCO值),这是dingxing**ceding结guo报告的依据。

三、标本复chaELISA蕑hiぜ靋e过cheng复杂,yingxiang因素较多,即使shi内质控在控,ye可能因kongjian差异而造成结guo的差异,因此jia大复cha力度是保证结guo譲i穢ing祄u煽糠椒ǎre缍狱/span>HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等项mu祄u蓎i、弱阳xing标本及少见模式的检ce结guo进行复cha。

四、结guo判断和报告常用下列几謟hi椒ū硎窘醙uo:

1.dingxingceding

2.banding量ceding 结guo一般以滴度表示。

3.ding量ceding 糲ong靡褄hi量的标准pin作一系列xi释hou进行ELISAceding,绘制标准曲线,结guo以you良量或单位表示。在ELISAding羕ao靋e中mei一kuai穋ongΠ宥急匦牖嬷葡嘤Φ谋曜记摺Ⅻ/span>

注意事项:

仔xi阅读说mingshu。

检cha试剂盒标签上的有xiao期。如guochao过有xiao期,请勿使用。

按说mingshu萬anㄋ惺约疗肴ㄊ俊⑻寤Ⅻ/span>

标本制备要guifan,mei份标本体积要按2-3个复kong以上的量制备(贮存),尽量分装做备份。短期内无法实yan者,注意di温保存。

准备好所有实yanewai所需物pin,(眗e缫苰e器,试guan,清洗器,酶标yi)。

按说mingshu将所用试剂平衡至shi温,gen据检ce标本数量萬anㄋ枋约恋牧俊Ⅻ/span>

检cha试剂盒内mei种试剂的贮存tiao件,保证所有试剂均按照试剂盒内说mingshutui荐的tiao件存储。

检cha不稳ding或者bian质的试剂溶ye(眗e绯恋砘騜ian色)。有些试剂,眗e绫曜紁inxi释ye或者检cexi释ye,可能在设计时jiu含有沉淀物。所有试剂在滴入酶标板之前,必需充分hun詑u6捎诔恋砦锏奶豿ing,在jia入酶标板之前,必需不停搅拌。

保证充分的孵育时jian和温秖uⅫ/span>

qie勿使用不同sheng产pi号的试剂qu代现有试剂或hun合现有试剂。

在hun合或溶解蛋白溶ye时,避mian泡沫产sheng。

在实yan开始之前,安排好实yan流cheng。

在实yan开始之前,清洁工作台。

若有问ti,应yuwo公司或代li商的技术zhi持联系

成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)试剂盒结guo判断:

1. mei个标准pin的OD值减去空白kong的OD值hou作图,如设置复kong,则应quqi平均值计算。以标准pin的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘出标准曲线。亦可以OD值为横坐标,标准pin的浓度为纵坐标,绘出标准曲线。

2. tui荐使用专襠ang那咧谱魅砑纥/span>curve expert 1.31.4,在软件界面ji可gen据yangpinOD值,由标准曲线cha出相应的浓度,乘以xi释倍数ui嗫山珁angpin的OD值代入标准曲线的拟合方cheng式,计算出yangpin浓度,再乘以xi释倍数,即为yangpin的实际浓秖uⅫ/span>

3. 若yangpinOD值高于标准曲线上xian,应适dangxi释houzhongce,计算浓度时应乘以xi释倍数。 

成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)试剂盒有xiao期稳dingxingkao察

本试yan以成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)为例

1.  OD值:

正常保存tiao件下有xiao期内和chao过有xiao期2个yue所ceOD謉ang冉吸/span>

正常有xiao期内OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

chao过2个yue有xiao期OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收率:分bie于ding值血清及血浆中jia入一ding量的成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)标准pin,zhong复ceding并计算qipin均值,回收率为ceding值yuli论謉ang谋嚷省Ⅻ/span>

        正常保存tiao件下有xiao期内和过有xiao期2个yueelisa 试剂盒回收率检ce结guo

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. 线xing:分bie于ding值血清及血浆中jia入一ding量的成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)标准pin,并将标本按1:2,1:4,1:8xi释,线xingfan围即为xi释houyang本中成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)含量的ceding值yuli论謉ang谋嚷省Ⅻ/span>

         正常保存tiao件下有xiao期内和过有xiao期2个yueelisa 试剂盒回线xing检ce结guo

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  精密度:以yangpinceding謉ang腷ian异系数CV表示。CV%=SD/meanx100

pi内差:qu同一pi次试剂盒对di值,中值和高值yang本进行ding羕ao靋e,mei份yang本ceding20次,分bie计算不同浓度yang本的平均值和SD值。

pijian差:选qu 3 个不同pi次的试剂盒分bie对di、中、高值ding值yang本进行ding量ceding, mei个yang本使用同一试剂盒zhong复ceding 8 次,分bie计算不同浓度yang本的平均值及 SD 值。(pi内差: CV<10%;pijian差: CV<11%)

       正常保存tiao件下有xiao期内和过有xiao期2个yueelisa 试剂盒回精密度检ce结guo

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

成纤维xibaosheng长因子7(FGF7)试剂盒会出现的问ti及解jue办法:

1. jia入穋ongχ誾hiyehou,没有吸光值或吸光值偏di。

a.原因:未jia入酶标记物。

解jue办法:请按照操作步骤进行。

b.原因:试剂盒内容物未能充分回。

解jue办法:萬anㄊ约梁心谌菸锘匚耯ou再进行操作。

c.原因:shi温taidi。

解jue办法:若shi温taidi(<19),请于操作步骤4,适dang延长温育时jian。

d.原因:未使用试剂盒的清洗ye清洗。

解jue办法: 请用试剂盒内所ti供的清洗ye清洗。

e.原因:试剂盒已过有xiao期xian。

解jue办法:请更换成仍在有xiao期xian内的试剂盒。

2. 标准曲线线xing不佳,或是平行xing不好。

a.原因:温育位置避光不好或受到气流gan扰。

解jue办法: 请确认温育位置ji不透光ye不透风(如chou屉内)

b.原因:操作时jian拖tai久。

解jue办法:请在方法熟lianhou再进行操作。

c.原因:微kongjian相互污ran。

解jue办法: jiayangpin时,请小心勿溅出微kongwai,以mian造成qita微kong的污ran。

d.原因:标准pin或酶标记物所jia入的量瞙ui恢隆Ⅻ/span>

解jue办法:请使用已xiao正过的移ye枪,并确保qiyu吸头之jian有高度密合xing。

e.原因:添jiayangpin或试剂的操作方法不正确。

解jue办法:jiayangpin或试剂时,吸头请勿接触微kong。

f.原因:洗板过chengfasheng问ti(如guan路du塞、洗完板hou未立刻进行下一步骤)

解jue办法:请随时监控洗板机洗板过cheng,洗完hou立即进行下一步骤。

3. 吸光值均偏高(或线xing不gou陡)

a.原因:shi温tai高(>25)

解jue办法: 若无法絛ang蛃hi内温度,请适dang缩短步骤4的温育时jian。

b.原因:底物溶ye受到污ran。

解jue办法: 若fa现底物溶ye已呈现淡蓝色,请瞙ui偈褂谩Ⅻ/span>

c.原因:穋ongκ眏ianchao过tai久。

解jue办法:请控謕incongκ眏ian。

d.原因:酶标记物污ran了盒内qita试剂。

解jue办法:使用过的吸头应立即丢弃,可避mian试剂jian相互污ran,凡是试剂(特bie是酶标记物yu底物溶ye)接触过的容器应立即清洗gan净。(先以漂白水jin泡,再以清水chong洗gan净,可确保无残留)

4. yinxing标准pin的吸光謉ang陀谘魓ing标准pin的吸光值。

a.原因:微kong中的试剂未能充分hun簒iⅫ/span>

解jue办法: 试剂jia完hou,需qing敲盘四周使qi充分hun合均詑uⅫ/span>

b.原因:洗板过chengfasheng问ti(2-f.)

解jue办法:请cankao2-f.

c.原因:添jiayangpin或酶标记物的量瞙ui恢隆Ⅻ/span>

解jue办法: 请cankao2-d.

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