资料

人嗜铬蛋白B(CHGB)试剂盒

如果您对竚eixing巳さ幕?可yi
名称: 人嗜铬蛋白B(CHGB)试剂盒
型hao: CHGB
zhan商: ELISA试剂盒
文dang: 无相关文dang

简单jie绍

mg游戏排行


人嗜铬蛋白B(CHGB)试剂盒  的详xijie绍


嗜铬蛋白B(CHGB)试剂盒

shi用说明书

嗜铬蛋白B(CHGB)试剂盒基ben原理:

ben试剂盒采用shuang紉ing腅LISAfa。用抗人CHGB包被于mei标板上,实yan时样品或标准品中的人CHGB与包被结合,游离的cheng穤hi幌慈ァR来蝚ia入sheng物素化的抗人CHGB和纀ei齳ang化物mei标ji的亲和素。抗人CHGB与结合在包被蓌i娜薈HGB结簒iheng物素与亲和素特yi性结合而形cheng**复合物,游离的cheng穤hi幌慈ァia入显se底物(TMB),TMB在纀ei齳ang化物mei的催化下呈现蓝se,jiazhong止液后bianchenghuangse。用mei标仪在450nmbochang处测OD值,人CHGB浓度与OD450值之jian呈正比,通过绘zhi标譲i呒扑鉩hu样品中人CHGB的浓度。

嗜铬蛋白B(CHGB)试剂盒miao述:

英文名称 Human CHGB (Chromogranin B) ELISA Kit
中文名称 人嗜铬蛋白B(CHGB)mei联**xi附测定试剂盒
huohao X-EL-H0832c 种属 Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
jian测方fa shuang紉ing膄a
jian测fan围 62.5~4000pg/mL 灵敏度 37.5pg/mL

试剂盒zucheng:

中文名称

英文名称

规格

保存

  ELISAmei标板(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标准品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准品&样品xi释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓suosheng物素化

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

sheng物素化xi释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓suoHRPmei结合物

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避光)

mei结合物xi释液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓suo洗涤液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

穋onghong止液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板fu膜

Plate Sealer

  5/3 *

 

说明书

Product  Description

  1 

 

质jian报告

Certificate of Analysis

  1 

 

特别说明
*: [96T/48T](打开包zhuang后请及时jian查suo有物品是fu齐全完整)
#: 一周内shi用可存于4℃,xuchang时jian存放或多次shi用jianyi存于-20.                                      

嗜铬蛋白B(CHGB)试剂盒jian测前准beigong作:

1. 请提前20分zhongcong冰箱中取chu试剂盒,平衡至室温。

2. 将浓suo洗涤液用shuang蒸水xi释(1:25)。蝐ong猛甑姆呕?/span>4℃。cong冰箱中取chu的浓suo洗涤液可能有结晶,属于正常现象,可用40℃水浴weijia热shi结晶完全溶解后再配zhi洗涤液(jia热温度瞙ui?/span>50℃,shi用时洗涤液应wei室温)。当日shi用。

3. 标准品10000×g离心1分zhong,jia入标准品&样品xi释液1.0mL至冻干标准品中,旋紧管盖,jing置10分zhong,上下颠dao数次,待其充分溶解后,用yi液器将其轻轻hun匀(浓度wei8000pg/mL)。ran后根据xu要进xing倍比xi释(zhu:瞙ui獄hi接在穋ongong中进xing倍比xi释)。jianyi配zhichengyi下浓度:按照xi释方fa图例 标准品&样品xi释液zhi接作wei空白kong0ng/mL。如配zhi5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mL的上述标准品jia入含有0.5mL标准品&样品xi释液的EP管中,hun匀即可,其余浓度依此类推。 

4. sheng物素化gong作液:实yan前计算当次实yansuoxu用量(yi100μL/kong计),实际配zhi时应多配zhi100-200μL。shi用前15分zhong,yisheng物素化xi释液xi释浓suosheng物素化(1:100)chenggong作浓度。当日shi用。

5. mei结合物gong作液:实yan前计算当次实yansuoxu用量(yi100μL/kong计),实际配zhi时应多配zhi100-200μL。shi用前15分zhong,yimei结合物xi释液xi释浓suoHRPmei结合物(1:100)chenggong作浓度。

当日shi用。

嗜铬蛋白B(CHGB)试剂盒标准品xi释方fa图例:(yi500μL/管wei例,也可根据实际用量来xi释,如200μL/管)

            

1. 在各kong中jia入标准品或样品各100μL 37℃孵育90分zhong

2. jia入100μsheng物素化gong作液,37℃孵育60分zhong

3. 洗涤3

4. jia入100μLmei结合物gong作液, 37℃孵育30分zhong

5. 洗涤5

6. jia入90μL底物溶液, 37℃孵育15分zhong左右

7. jia入50μLzhong止液,立即在450nmbochang处测量OD

8. 结果计算

一、操作因素对ELISA结果的影响ELISA操作步骤复杂,操作不当将引起较大的误cha。yi下叙述各个步骤中的影响因素。

1.jia样

2.温育

3.洗涤

4.显se

5.比se

二、hui区的设置通常情况下,ELISA定性实yanyi“阳性”和“yin性”来报告结果,两者jian有一tiao分界线被称wei“阳性判断值”(cut-off valueCO值),这是定性**测定结果报告的依据。

三、标ben复查ELISAshougongjian测过程复杂,影响因素较多,即shi室内质kong在kong,也可能因kongjianchayi而造cheng结果的chayi,因此jia大复查力度是保zheng结果准确性的可靠方fa,比如对HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等项目的可疑、弱阳性标ben及少jian模式的jian测结果进xing复查。

si、结果判断和报告常用下列几謟hi絝a表示结果:

1.定性测定

2.半定量测定 结果一般yi滴度表示。

3.定量测定 糲ong靡阎康谋曜计纷饕粁i列xi释后进xingELISA测定,绘zhi标譲i撸峁鹹i优liang量或单位表示。在ELISA定量jian测中每一块穋ongΠ宥急豿u绘zhi相应的标譲i摺Ⅻ/span>

zhu意事项:

仔xi阅读说明书。

jian查试剂盒标qian蓌i挠xing凇H绻xing冢胛餾hi用。

按说明书萬an╯uo有试剂齐全(数量、tiji)。

标benzhibei要规fan,每份标bentiji要按2-3个复kongyi蓌i牧縵hibei(贮存),尽量分zhuang做bei份。短期内无fa实yan者,zhu意低温保存。

准bei好suo有实yan额外suoxu物品,(比如yi液器,试管,qing洗器,mei标仪)。

按说明书将suo用试剂平衡至室温,根据jian测标ben数量萬an╯uoxu试剂的量。

jian查试剂盒内每种试剂的贮存tiao件,保zhengsuo有试剂jun按照试剂盒内说明书推荐的tiao件存chu。

jian查不稳定或者bian质的试剂溶液(比如chen淀或bianse)。觴ing┦约粒热绫曜计穢i释液或者jian测xi释液,可能在设计蔮en秃衏hen淀物。suo有试剂在滴入mei标板之前,必xu充分hun匀。而由于chen淀物的特性,在jia入mei标板之前,必xu不停搅拌。

保zheng充分的孵育时jian和温度。

切勿shi用不同sheng产批hao的试剂取代蟴hong惺约粱騢un合蟴hong惺约痢Ⅻ/span>

在hun合或溶解蛋白溶液时,避免泡沫产sheng。

在实yan开始之前,安排好实yan流程。

在实yan开始之前,qing洁gong作tai。

ruo有问题,应与我公薺ing虼砩痰募际踔hi联xi

嗜铬蛋白B(CHGB)试剂盒结果判断:

1. 每个标准品的OD值jian去空白kong的OD值后作图,如设謒ei磌ong,则应取其平jun值计算。yi标准品的浓度wei横坐标,OD值weizong坐标,绘chu标譲i摺R嗫蓎iOD值wei横坐标,标准品的浓度weizong坐标,绘chu标譲i摺Ⅻ/span>

2. 推荐shi用zhuan襠ang那遺hi作软件,如curve expert 1.31.4,在软件界mian既可根据样品OD值,由标譲i卟閏hu相应的浓度,乘yixi释倍数ui嗫山返命/span>OD值代入标譲i叩哪夂戏匠淌剑扑鉩hu样品浓度,再乘yixi释倍数,即wei样品的实际浓度。

3. ruo样品OD值gao于标譲i呱舷蓿κ实眡i释后重测,计算浓度时应乘yixi释倍数。 

嗜铬蛋白B(CHGB)试剂盒觴ing谖榷ㄐ钥疾朦/span>

ben试yanyi嗜铬蛋白B(CHGB)wei例

1.  OD值:

正常保存tiao件下觴ing谀诤统xing冱span>2个月suo测OD值比较

正常觴ing谀冱span>OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月觴ing冱/span>OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收率:穤hi鹩诙ㄖ笛猶ing及血浆中jia入一定量的嗜铬蛋白B(CHGB)标准品,重复测定并计算其品jun值,回收率wei测定值与理lun謉ang谋嚷省Ⅻ/span>

        正常保存tiao件下觴ing谀诤凸xing冱span>2个月elisa 试剂盒回收率jian测结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. 线性:穤hi鹩诙ㄖ笛猶ing及血浆中jia入一定量的嗜铬蛋白B(CHGB)标准品,并将标ben按1:2,1:4,1:8xi释,线性fan围即weixi释后样ben中嗜铬蛋白B(CHGB)含量的测定值与理lun謉ang谋嚷省Ⅻ/span>

         正常保存tiao件下觴ing谀诤凸xing冱span>2个月elisa 试剂盒回线性jian测结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  精密度:yi样品测定謉ang腷ianyixi数CV表示。CV%=SD/meanx100

批内cha:取同一批次试剂盒对低值,中值和gao值样ben进xing定量jian测,每份样ben测定20次,穤hi鸺扑悴煌ǘ妊鵥en的平jun值和SD值。

批jiancha:选取 3 个不同批次的试剂盒穤hi鸲缘汀⒅小ao值定值样ben进xing定量测定, 每个样benshi用同一试剂盒重复测定 8 次,穤hi鸺扑悴煌ǘ妊鵥en的平jun值及 SD 值。(批内cha: CV<10%;批jiancha: CV<11%)

       正常保存tiao件下觴ing谀诤凸xing冱span>2个月elisa 试剂盒回精密度jian测结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

嗜铬蛋白B(CHGB)试剂盒会chu现的问题及解决办fa:

1. jia入穋onghong止液后,mei有xi光值或xi光值偏低。

a.原因:未jia入mei标ji物。

解决办fa:请按照操作步骤进xing。

b.原因:试剂盒内容物未能充分回。

解决办fa:萬anㄊ约梁心谌菸锘匚潞笤俳鴛ing操作。

c.原因:室温太低。

解决办fa:ruo室温太低(<19),请于操作步骤4,适当延chang温育时jian。

d.原因:未shi用试剂盒的qing洗液qing洗。

解决办fa: 请用试剂盒内suo提gong的qing洗液qing洗。

e.原因:试剂盒已过觴ing谙蕖Ⅻ/span>

解决办fa:请genghuanchengreng在觴ing谙弈诘氖约梁小Ⅻ/span>

2. 标譲i呦咝圆患眩蚴瞧絰ing性不好。

a.原因:温育位置避光不簃ei蚴艿絨i流干扰。

解决办fa: 请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)

b.原因:操作时jian拖太久。

解决办fa:请在方fashulian后再进xing操作。

c.原因:weikongjian相hu污染。

解决办fa: jia样品时,请小心勿溅chuweikong外,yi免造cheng其它weikong的污染。

d.原因:标准品或mei标ji物suojia入的量瞙ui恢隆Ⅻ/span>

解决办fa:请shi用已校正过的yi液枪,并确保其与xi头之jian有gao度密合性。

e.原因:添jia样品或试剂的操作方fa不正确。

解决办fa:jia样品或试剂时,xi头请勿接触weikong。

f.原因:洗板过程发sheng问题(如管耭an氯⑾赐臧搴笪戳⒖探鴛ing下一步骤)

解决办fa:请sui时jiankong洗板机洗板过程,洗完后立即进xing下一步骤。

3. xi光值jun偏gao(或线性不够陡)

a.原因:室温太gao(>25)

解决办fa: ruo无fa絛ang褪夷谖露龋胧实眘uo短步骤4的温育时jian。

b.原因:底物溶液受到污染。

解决办fa: ruo发现底物溶液已呈现淡蓝se,请瞙ui賡hi用。

c.原因:穋ongκ眏ian超过太久。

解决办fa:请kongzhi穋ongκ眏ian。

d.原因:mei标ji物污染了盒内其它试剂。

解决办fa:shi用过的xi头应立即丢弃,可避免试剂jian相hu污染,凡是试剂(特别是mei标ji物与底物溶液)接触过的容器应立即qing洗干jing。(先yi漂白水浸泡,再yiqing水冲洗干jing,可确保无can留)

4. yin性标准品的xi光謉ang陀谘粜员曜计返膞i光值。

a.原因:weikong中的试剂未能充分hun簒iⅫ/span>

解决办fa: 试糽iang油旰螅瑇u轻敲盘si周shi其充分hun合jun匀。

b.原因:洗板过程发sheng问题(2-f.)

解决办fa:请参考2-f.

c.原因:添jia样品或mei标ji物的量瞙ui恢隆Ⅻ/span>

解决办fa: 请参考2-d.