资liao

人原纤蛋白3(FBN3)试剂盒

如guo您对该感xing趣dehua,可yi
名称: 人原纤蛋白3(FBN3)试剂盒
型号: FBN3
展商: ELISA试剂盒
文档: 无xiang关文档

简单介绍

网投网


人原纤蛋白3(FBN3)试剂盒  de详蟜u樯埸/font>


人原纤蛋白3(FBN3)试剂盒

shi用说ming书

人原纤蛋白3(FBN3)试剂盒基ben原理:

ben试剂盒cai用shuang夹xinELISAfa。用抗人FBN3包被于酶标板上,实验shi样品或标准品中de人FBN3yu包被结合,you离decheng分被洗qu。襩ai渭尤肷锼豩uade抗人FBN3和纀ei鮤ua物酶标jide亲和素。抗人FBN3yu结合在包被上de人FBN3结合、生物素yu亲和素te异xing结合erxingcheng**复合物,you离decheng分被洗qu。加入显色底物(TMB),TMB在纀ei鮤ua物酶de催hua下呈现lan色,加终止液后变cheng黄色。用酶标yi在450nmbo长chu测OD值,人FBN3浓duyuOD450值之间呈正比,通过绘制标譲i呒扑鉩hu样品中人FBN3de浓du。

人原纤蛋白3(FBN3)试剂盒描述:

英文名称 Human FBN3 (Fibrillin 3) ELISA Kit
謝ing拿劈/span> 人原纤蛋白3(FBN3)酶联**吸fu测定试剂盒
货号 X-EL-H2268c 种属 Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测方fa shuang夹xinfa
检测范围 0.313~20ng/mL 灵敏du 0.188ng/mL

试剂盒组cheng:

謝ing拿劈/span>

英文名称

规格

保存

  ELISA酶标板(可拆xie)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标准品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准品&样品稀释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓缩生物素hua

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生物素hua稀释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩HRP胒u岷衔铧/span>

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(biguang)

胒u岷衔锵∈鸵裹/span>

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩洗涤液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(biguang)

反应终止液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板fu膜

Plate Sealer

  5/3 *

 

说ming书

Product  Description

  1 

 

质检报告

Certificate of Analysis

  1 

 

te别说ming
*: [96T/48T](打开包装后请及shi检查所觴ing锲肥欠衿肴暾?/span>
#: 
一周内shi用可存于4℃,需长shi间存放或多次shi用jianyi存于-20.                                      

人原纤蛋白3(FBN3)试剂盒检测前准bei工zuo:

1. 请ti前20分钟从冰xiang中取chu试剂盒,ping衡至室wen。

2. 将浓缩洗涤液用shuang蒸水稀释(1:25)。未用完de放hui4℃。从冰xiang中取chude浓缩洗涤液可能有结jing,属于正常现象,可用40℃水浴微加热shi结jing完全溶解后再配制洗涤液(加热wendu不要超过50℃,shi用shi洗涤液应wei室wen)。当日shi用。

3. 标准品10000×g离xin1分钟,加入标准品&样品稀释液1.0mL至冻干标准品中,旋jin管盖,静zhi10分钟,上下颠dao数次,待其充分溶解后,用移液器将其轻轻hunyun(浓duwei8000pg/mL)。然后根ju需要jin行倍比稀释(注:不要直接在反应kong中jin行倍比稀释)。jianyi配制chengyi下浓du:按zhao稀释方fa图例 标准品&样品稀释液直接zuowei空白kong0ng/mL。如配制5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mLde上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释液deEP管中,hunyun即可,其余浓du襩ai死嗤啤Ⅻ/span> 

4. 生物素hua工zuo液:实验前计算当次实验所需用量(yi100μL/kong计),实际配制shi应多配制100-200μL。shi用前15分钟,yi生物素hua稀释液稀释浓缩生物素hua(1:100)cheng工zuo浓du。当日shi用。

5. 胒u岷衔锕uo液:实验前计算当次实验所需用量(yi100μL/kong计),实际配制shi应多配制100-200μL。shi用前15分钟,yi胒u岷衔锵∈鸵合∈团ㄋ酎/span>HRP胒u岷衔铧/span>(1:100)cheng工zuo浓du。

当日shi用。

人原纤蛋白3(FBN3)试剂盒标准品稀释方fa图例:(yi500μL/管wei例,也可根ju实际用量lai稀释,如200μL/管)

            

1. 在gekong中加入标准品或样品ge100μL 37℃孵yu90分钟

2. 加入100μ生物素hua工zuo液,37℃孵yu60分钟

3. 洗涤3

4. 加入100μL胒u岷衔锕uo液, 37℃孵yu30分钟

5. 洗涤5

6. 加入90μL底物溶液, 37℃孵yu15分钟zuo右

7. 加入50μL终止液,立即在450nmbo长chu测量OD

8. 结guo计算

一、操zuo因素对ELISA结guode影响ELISA操zuo步骤复杂,操zuo不当将引qi较大de误差。yi下叙述ge个步骤中de影响因素。

1.加样

2.wenyu

3.洗涤

4.显色

5.比色

二、粂i鴇eshezhi通常qing况下,ELISA定xing实验yi“yangxing”和“阴xing”lai报告结guo,两者间有一条分jie线被称wei“yangxing舩ie现怠保?/span>cut-off valueCO值),zhe是定xing**测定结guo报告de依ju。

三、标ben复查ELISA手工检测过程复杂,影响因素较多,即shi室内质控在控,也可能因kong间差异er造cheng结guode差异,因此加大复查力du是保证结guo譲i穢ingde可靠方fa,比如对HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等项目de可yi、弱yangxing标ben及少见模式de检测结guojin行复查。

四、结guo舩ie虾捅ǜ娉S孟耹ie几种方fa表示结guo:

1.定xing测定

2.半定量测定 结guo襤ua銀i滴du表示。

3.定量测定 即用已zhi量de标准品zuo一系lie稀释后jin行ELISA测定,绘制标譲i撸醙uoyi优良量或单位表示。在ELISA定量检测中每一块反应板都必须绘制xiang应de标譲i摺Ⅻ/span>

注意事项:

zi细阅秎iao祄ing书。

检查试剂盒标签上de有效期。如guo超过有效期,请勿shi用。

按说ming书que定所有试剂齐全(数量、体积)。

标ben制bei要规范,每份标ben体积要按2-3个复kongyi上de量制bei(贮存),尽量分装做bei份。duan期内无fa实验者,注意diwen保存。

准bei好所有实验额wai所需物品,(比如移液器,试管,清洗器,酶标yi)。

按说ming书将所用试剂ping衡至室wen,根ju检测标ben数量que定所需试剂de量。

检查试剂簒in诿恐质约羋e贮存条件,保证所有试剂均按zhao试剂簒in谒祄ing书推荐de条件存储。

检查不稳定或者变质de试剂溶液(比如沉dian或变色)。有些试糽i热绫曜计废∈鸵夯蛘呒觳庀∈鸵海赡茉趕he计shijiu含有沉dian物。所有试剂在滴入酶标板之前,必需充分hunyun。eryou于沉dian物detexing,在加入酶标板之前,必需不停搅ban。

保证充分de孵yushi间和wendu。

莤ing餾hi用不同生产pi号de试剂取代现有试剂或hun合现有试剂。

在hun合或溶解蛋白溶液shi,bi免泡沫产生。

在实验开始之前,安排好实验流程。

在实验开始之前,清洁工zuotai。

若觴ing侍猓u我公司或代理商de技术支持联系

人原纤蛋白3(FBN3)试剂盒结guo舩ie吸/span>:

1. 每个标准品deOD值减qu空白kongdeOD值后zuo图,如shezhi复kong,则应取其ping均值计算。yi标准品de浓duwei横坐标,OD值wei纵坐标,绘chu标譲i摺R嗫蓎iOD值wei横坐标,标准品de浓duwei纵坐标,绘chu标譲i摺Ⅻ/span>

2. 推荐shi用专业de曲线制zuo软件,如curve expert 1.31.4,在软件jie面ji可根ju样品OD值,you标譲i卟閏huxiang应de浓du,乘yi稀释倍数;亦可将样品deOD值代入标譲i遜e拟合方程式,计算chu样品浓du,再乘yi稀释倍数,即wei样品de实际浓du。

3. 若样品OD值高于标譲i呱舷蓿κ实毕∈秃髗hong测,计算浓dushi应乘yi稀释倍数。 

原纤蛋白3(FBN3)试剂盒有效期稳定xing考cha

ben试验yi原纤蛋白3(FBN3)wei例

1.        OD值:

正常保存条件下有效期内和超过有效期2个月所测OD值比较

正常有效期内OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月有效期OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.hui收lv:分别于定值血清及血jiang中加入一定量de原纤蛋白3(FBN3)标准品,zhong复测定并计算其品均值,hui收lvwei测定值yu理论值de比lv。

        正常保存条件下有效期内和过有效期2个月elisa 试剂盒hui收lv检测结guo

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

 

3.       线xing:分别于定值血清及血jiang中加入一定量de原纤蛋白3(FBN3)标准品,并将标ben按1:2,1:4,1:8稀释,线xing范围即wei稀释后样ben謝ing说鞍?(FBN3)含量de测定值yu理论值de比lv。

         正常保存条件下有效期内和过有效期2个月elisa 试剂盒hui线xing检测结guo

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

 

4.        精midu:yi样品测定值de变异系数CV表示。CV%=SD/meanx100

pi内差:取同一pi次试剂簒ie詃i值,中值和高值样benjin衳ie考觳猓糠菅鵥en测定20次,分别计算不同浓du样bendeping均值和SD值。

pi间差:选取 3 个不同pi次de试剂盒分别对di、謝iao⒏咧刀ㄖ笛鵥enjin衳ie坎舛ǎ?/span> 每个样benshi用同一试剂盒zhong复测定 8 次,分别计算不同浓du样bendeping均值及 SD 值。(pi内差: CV<10%;pi间差: CV<11%)

       正常保存条件下有效期内和过有效期2个月elisa 试剂盒hui精midu检测结guo

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

 

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

人原纤蛋白3(FBN3)试剂盒会chu现de问题及解决办fa:

1. 加入反应终止液后,没觴ing黦uang值或吸guang值偏di。

a.原因:未加入酶标ji物。

解决办fa:请按zhao操zuo步骤jin衳iaoⅫ/span>

b.原因:试剂簒in谌菸镂茨艹浞謍ui。

解决办fa:que定试剂簒in谌菸飄uiwen后再jin行操zuo。

c.原因:室wen太di。

解决办fa:若室wen太di(<19),请于操zuo步骤4,适当延长wenyushi间。

d.原因:未shi用试剂盒de清洗液清洗。

解决办fa: 请用试剂簒in谒鵷i供de清洗液清洗。

e.原因:试剂盒已过有效期限。

解决办fa:请更换cheng仍在有效期限内de试剂簒iaoⅫ/span>

2. 标譲i呦選ing不jia,或是ping行xing不好。

a.原因:wenyu位zhibiguang不好或受到qi流干扰。

解决办fa: 请que认wenyu位zhiji不透guang也不透风(如chou屉内)

b.原因:操zuoshi间拖太久。

解决办fa:请在方fashu练后再jin行操zuo。

c.原因:微kong间xiang互污染。

解决办fa: 加样品shi,请xiaoxin勿溅chu微kongwai,yi免造cheng其它微kongde污染。

d.原因:标准品或酶标ji物所加入de量不一致。

解决办fa:请shi用已校正过de移液枪,并que保其yu吸头之间有高dumi合xing。

e.原因:添加样品或试剂de操zuo方fa不正que。

解决办fa:加样品或试剂shi,吸头请勿接触微kong。

f.原因:洗板过程发生问题(如管路堵sai、洗完板后未立刻jin行下一步骤)

解决办fa:请随shijian控洗板机洗板过程,洗完后立即jin行下一步骤。

3. 吸guang值均偏高(或线xing不gou陡)

a.原因:室wen太高(>25)

解决办fa: 若无fa降di室内wendu,请适当缩duan步骤4dewenyushi间。

b.原因:底物溶液受到污染。

解决办fa: 若发现底物溶液已呈现danlan色,请不要再shi用。

c.原因:反应shi间超过太久。

解决办fa:请控制反应shi间。

d.原因:酶标ji物污染liao簒in谄渌约痢Ⅻ/span>

解决办fa:shi用过de吸头应立即丢弃,可bi免试剂间xiang互污染,凡是试剂(te别蕅iao副阩i物yu底物溶液)接触过de容器应立即清洗干净。(先yi漂白水浸泡,再yi清水chong洗干净,可que保无残留)

4. 阴xing标准品de吸guang值di于yangxing标准品de吸guang值。

a.原因:微kong中de试剂未能充分hun合。

解决办fa: 试剂加完后,需轻qiao盘四周shi其充分hun合均yun。

b.原因:洗板过程发生问题(2-f.)

解决办fa:请can考2-f.

c.原因:添加样品或酶标ji物de量不一致。

解决办fa: 请can考2-d.

 

留言
标题
联系人
联系电hua
内容
验证码
dian击换一张
注:1.可yishi用快捷jianAlt+S或Ctrl+Enter发songxin息!
2.如有必要,请您留下您de详细联系方式!