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人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂he

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名称: 人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂he
型号: mxd1
展商: ELISA试剂he
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人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂he  dexiang细介绍


人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂he

使用shuoming书

人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂heji本原理:

本试剂he采用双夹心ELISA法。用抗人mxd1包被于酶标ban上,实验时样品或标准品中de人mxd1与包被结合,游离decheng分被xi去。依次加入sheng物素化de抗人mxd1和辣根过氧化物酶标记de亲和素。抗人mxd1与结合zai包被上de人mxd1结合、sheng物素与亲和素te异xing结合而形cheng**复合物,游离decheng分被xi去。加入显色底物(TMB),TMBzai辣根过氧化物酶de催化下cheng现蓝色,加终zhi液hou变cheng黄色。用酶标仪zai450nm波长处测OD值,人mxd1浓度与OD450值之间cheng正bi,通过绘zhi标准曲xian计算chu样品中人mxd1de浓秖uⅫ/span>

人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂hemiao述:

英文名称 Human MXD1 (MAX Dimerization Protein 1) ELISA Kit
中文名称 人MAX二聚化蛋白1(mxd1)酶联**吸附测定试剂he
货号 X-EL-H0896c 种属 Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测方法 双夹心法
检测范围 0~ 灵min度 0

试剂he组cheng:

中文名称

英文名称

规格

保存

  ELISA酶标ban(ke拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻gan标准品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准品&样品稀释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓suosheng物素化

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

sheng物素化稀释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓suoHRP酶结合物

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避光)

酶结合物稀释液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓suoxi祔ouhai?/span>25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶襤ai?/span>TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

反应终zhi液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封ban覆mo

Plate Sealer

  5/3 *

 

shuoming书

Product  Description

  1 

 

謘hi毂ǜ妩/span>

Certificate of Analysis

  1 

 

te别shuoming
*: [96T/48T](打开包装hou请ji时检查所有物品shifu齐quan完整)
#: 
一周内使用ke存于4℃,需长时间存fang或多磜en褂媒ㄒ榇嬗冱/span>-20.                                      

人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂he检测前准备工作:

1. 请提前20分钟从bing箱中quchu试剂he,平衡至室蝜ongⅫ/span>

2. 将浓suoxi祔ou河盟羲∈厅/span>(1:25)。未用完defang回4℃。从bing箱中quchude浓suoxi祔ou簁eneng有结jing,属于正常现xiang,ke用40℃水yu微加热使结jing完quan溶解hou再配zhixi祔ouhai尤任露萣u要超过50℃,使用时xi祔ou河ei室温)。礲i帐褂谩Ⅻ/span>

3. 标准品10000×g离心1分钟,加入标准品&样品稀释液1.0mL至冻gan标准品中,旋紧管盖,静置10分钟,上下颠倒数次,待其充分溶解hou,用移液器将其轻轻混yun(浓度wei8000pg/mL)。然hou根ju需要进行倍眗en∈停ㄗⅲ篵u要直接zai反应kong中进行倍眗en∈停=ㄒ榕鋤hicheng以下浓度:按照稀释方法图例 标准品&样品稀释液直接作wei空白kong0ng/mL。如配zhi5ng/mL标准品:qu0.5mL10ng/mLde上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释液deEP管中,混yun即ke,其余浓度依此类推。 

4. sheng物素化工作襤ai菏笛榍凹扑愕贝wen笛樗栌胠iang(以100μL/kong计),实际配zhi时应多配zhi100-200μL。使用前15分钟,以sheng物素化稀释液稀释浓suosheng物素化(1:100)cheng工作浓秖u5bi帐褂谩Ⅻ/span>

5. 酶结合物工作襤ai菏笛榍凹扑愕贝wen笛樗栌胠iang(以100μL/kong计),实际配zhi时应多配zhi100-200μL。使用前15分钟,以酶结合物稀释液稀释浓suoHRP酶结合物(1:100)cheng工作浓秖uⅫ/span>

礲i帐褂谩Ⅻ/span>

人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂he标准品稀释方法图例aiㄒ狱/span>500μL/管wei例,也ke根ju实际用liang来稀释,如200μL/管)

            

1. zaigekong中加入标准品或样品ge100μL 37℃孵育90分钟

2. 加入100μsheng物素化工作襤ai?/span>37℃孵育60分钟

3. xidi3

4. 加入100μL酶结合物工作襤ai?/span> 37℃孵育30分钟

5. xidi5

6. 加入90μL底物溶襤ai?/span> 37℃孵育15分钟左you

7. 加入50μL终zhi襤ai⒓磟ai450nm波长处测liangOD

8. 结果计算

一、操作因素对ELISA结果de影响ELISA操作bu骤复杂,操作瞙uai苯齫i絰i骴e误差。以下叙述ge个bu骤中de影响因素。

1.加样

2.温育

3.xidi

4.显色

5.bi色

二、灰区deshe置通常情况下,ELISA定xing实验襶u把魓ing”和“阴xing”来报告结果,两zhe间有一条分界xian被称wei“阳xing判断值”(cut-off valueCO值),这shi定xing**测定结果报告de依ju。

三、标本复查ELISA蕑hiぜ觳夤齝heng复杂,影响因素较多,即使室内质控zai控,也keneng因kong间差异而造cheng结果de差异,因此加大复查力度shi保证结果准确xingdeke靠方法,bi如对HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Abdeng项目dekeyi、弱阳xing标本ji少jianmo蔶iang募觳饨峁懈床椤Ⅻ/span>

四、结果判断和报告常用下列ji种方法表示结果:

1.定xing测定

2.半定liang测定 结果襤ua阋缘味缺硎jinⅫ/span>

3.定liang测定 即用已知liangde标准品作一系列稀释hou进行ELISA测定,绘zhi标准曲xian,结果以优良liang或单位表蔶inaiELISA定liang检测中每一kuai反应bandu必xu绘zhi相应de标准曲xian。

注意shi项:

zi细阅读shuoming书。

检查试剂he标qian上de有效期。如果超过有效期,请勿使用。

按shuoming书确定所有试剂齐quan(数liang、体ji)。

标本zhi备要规范,每份标本体ji要按2-3个复kong以上deliangzhi备(贮存),jinliang分装做备份。短期内无法实验zhe,注意低温保存。

准备好所有实验额外所需物品,(bi如移液器,试管,清xi器,酶标仪)。

按shuoming书将所用试剂平衡至室温,根ju检测标本数liang确定所需试剂deliang。

检查试剂he内每种试剂de贮存条件,保证所有试剂均按照试剂he内shuoming书推荐de条件存储。

检查buwen定或zhe变质de试剂溶襤ai╞i如沉淀或变色)。有些试剂,bi如标准品稀释液或zhe检测稀释襤ai琸enengzaishe计时就含有沉淀物。所有试剂zai祑en朊副阞an之前,必需充分混yun。而由于沉淀物detexing,zai加入酶标ban之前,必需bu停jiaoban。

保证充分de孵育时间和温秖uⅫ/span>

切勿使用bu同sheng产批号de试剂qu代现有试剂或混合现有试剂。

zai混合或溶解蛋白溶液时,避免泡mo产sheng。

zai实验开shi之前,癱ai藕檬笛榱鱟heng。

zai实验开shi之前,清洁工作tai。

若有wen题,应与我公司或代理商de技术支持联系

人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂he结果判断:

1. 每个标准品deOD值减去空白kongdeOD值hou作图,如she置复kong,ze应qu其平均值计算。襶uan曜计穌e浓度wei横坐标,OD值wei纵坐标,绘chu标准曲xian。yike以OD值wei横坐标,标准品de浓度wei纵坐标,绘chu标准曲xian。

2. 推荐使用专业de曲xianzhi作软件,如curve expert 1.31.4,zai软件界面既ke根ju样品OD值,由标准曲xian查chu相应de浓度,乘以稀释倍数;yike将样品deOD值代入标准曲xiande拟合方cheng式,计算chu样苀angǘ龋俪艘韵∈捅妒磜ei样品de实际浓秖uⅫ/span>

3. 若样品OD值高于标准曲xian上限,应适当稀释houzhong测,计算浓度时应乘以稀释倍数。 

MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂he有效期wen定xing考cha

本试验以MAX二聚化蛋白1(mxd1)wei例

1.        OD值:

正常保存条件下有效期内和超过有效期2个yue所测OD值bi较

正常有效期内OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个yue有效期OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收率:分别于定值血清ji血浆中加入一定liangdeMAX二聚化蛋白1(mxd1)标准品,zhong复测定并计算其品均值,回收率wei测定謉i肜砺壑礵ebi率。

        正常保存条件下有效期内和过有效期2个yueelisa 试剂he回收聅hi觳饨峁?/span>

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

 

3.       xianxing:分别于定值血清ji血浆中加入一定liangdeMAX二聚化蛋白1(mxd1)标准品,并将标本按1:2,1:4,1:8稀释,xianxing范围即wei稀释hou样本中MAX二聚化蛋白1(mxd1)含liangde测定謉i肜砺壑礵ebi率。

         正常保存条件下有效期内和过有效期2个yueelisa 试剂he回xianxing检测结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

 

4.        jing密度:以样品测定值de变异系数CV表蔶inⅫ/span>CV%=SD/meanx100

批内差:qu同一批磜en约羑e对低值,中值和高值样本进行定liang检测,每份样本测定20次,分别计算bu同浓度样本de平均值和SD值。

批间差:选qu 3 个bu同批次de试剂he分别对低、謝iao⒏咧刀ㄖ笛窘卸╨iang测定, 每个样本使用同一试剂hezhong复测定 8 次,分别计算bu同浓度样本de平均值ji SD 值。(批内差: CV<10%;批间差: CV<11%)

       正常保存条件下有效期内和过有效期2个yueelisa 试剂he回jing密度检测结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

 

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

人MAX二聚化蛋白1(mxd1)试剂he会chu现dewen题ji解决ban法:

1. 加入反应终zhi液hou,没有吸光值或吸光值偏低。

a.原因:未加入酶标记物。

解决ban法:请按照操作bu骤进衳iaoⅫ/span>

b.原因:试剂he内容物未neng充分回。

解决ban法:确定试剂he内容物回温hou再进行操作。

c.原因:室温太低。

解决ban法:若室温太低(<19),请于操作bu骤4,适当yan长温育时间。

d.原因:未使用试剂hede清xi液清xi。

解决ban法: 请用试剂he内所提供de清xi液清xi。

e.原因:试剂he已过有效期限。

解决ban法:请更huanchengrengzai有效期限内de试剂he。

2. 标准曲xianxianxingbu佳,或shi平行xingbu好。

a.原因:温育位置避光bu好或受到气流gan扰。

解决ban法: 请确ren温育位置既bu透光也bu透风(如抽屉内)

b.原因:操作时间拖太jiu。

解决ban法:请zai方法熟练hou再进行操作。

c.原因:微kong间相互污萰inⅫ/span>

解决ban法: 加样品时,请xiao心勿溅chu微kong外,以免造cheng其它微kongde污萰inⅫ/span>

d.原因:标准品或酶标记物所加入deliangbu一謑ongⅫ/span>

解决ban法:请使用已校正过de移液枪,并确保其与吸头之间有高度密合xing。

e.原因:添加样品或试剂de操作方法bu正确。

解决ban法:加样品或试剂时,吸头请勿接触微kong。

f.原因:xiban过chengfashengwen题(如管路堵塞、xi完banhou未立ke进行下一bu骤)

解决ban法:请随时监控xiban机xiban过cheng,xi完hou立即进行下一bu骤。

3. 吸光值均偏高(或xianxingbugou陡)

a.原因:室温太高(>25)

解决ban法: 若无法jiang低室内温度,请适当suo短bu骤4de温育时间。

b.原因:底物溶液受到污萰inⅫ/span>

解决ban法: 若fa现底物溶液已cheng现dan蓝色,请bu要再使用。

c.原因:反应时间超过太jiu。

解决ban法:请控zhi反应时间。

d.原因:酶标记物污染了he内其它试剂。

解决ban法:使用过de吸头应立即丢弃,ke避免试剂间相互污染,凡shi试剂(te别shi酶标记物与底物溶液)接触过de容器应立即清xigan净。(xian以漂白水浸泡,再以清水冲xigan净,ke确保无残留)

4. 阴xing标准品de吸光值低于阳xing标准品de吸光值。

a.原因:微kong中de试剂未neng充分混合。

解决ban法: 试剂加完hou,需轻敲盘四周使其充分混合均yun。

b.原因:xiban过chengfashengwen题(2-f.)

解决ban法:请参考2-f.

c.原因:添加样品或酶标记物deliangbu一謑ongⅫ/span>

解决ban法: 请参考2-d.

 

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