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大鼠甲胎蛋白(αFP)酶lian免疫吸附检ce试剂盒

如果nin对该感xing趣的话,可以
名称: 大鼠甲胎蛋白(αFP)酶lian免疫吸附检ce试剂盒
型号: αFP
展shang: ELISA试剂盒
文档: 无xiang关文档

简单介绍

亿豪娱乐是真的吗


大鼠甲胎蛋白(αFP)酶lian免疫吸附检ce试剂盒  的详xi介绍

大鼠甲胎蛋白(αFP)酶lian**吸附检ce试剂盒

使用说ming书

预qiying用

ben试剂簒ing擞胹huang夹心ELISAfa定量ce定大鼠血清、血浆、组织匀浆、xi胞裂解液、xi胞培养上清液heqita生物液体中甲胎蛋白(αFP)han量。

大鼠甲胎蛋白(αFP)酶lian**吸附检ce试剂盒基benyuanli:

ben试剂盒采用shuang夹心ELISAfa。觤ei勾笫蠹滋サ鞍?αFP)包被于酶标板上,实验时yangpin或标准pin中的大鼠甲胎蛋白(αFP)与包被结he,游离的cheng分被洗去。襩ai蝚iaru生物素化祄u勾笫蠹滋サ鞍?αFP)he纀ei趸锩副昙堑膓inhe素。kang大鼠甲胎蛋白(αFP)与结he在包被上的大鼠甲胎蛋白(αFP)结he、生物素与qinhe素特异xing结heer形cheng**复he物,游离的cheng分被洗去。jiaru显色底物(TMB),TMB在纀ei趸锩傅拇呋鲁氏掷渡琷ia终止液后biancheng黄色。用酶标仪在450nm波chang处ceODzhi,大鼠甲胎蛋白(αFP)nongdu与OD450zhi之间硈hou龋瑃ong过绘制标准曲线计算出yangpin中大鼠甲胎蛋白(αFP)的nongdu。

描述:

英文名称 Rat αFP (Alpha-Fetoprotein) ELISA Kit
中文名称 大鼠甲胎蛋白(αFP)酶lian**吸附ce定试剂盒
货号 X-EL-R0153c 种属 Rat/大鼠
规ge 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检ce方fa shuang夹心fa
检cefan围 0.313~20ng/mL 灵敏du 0.188ng/mL

组cheng:

中文名称

英文名称

规ge

保存

  ELISA酶标板(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

dong干标准pin

Reference Standard

  2/1 zhi*

4/-20 #

标准pin&yangpin稀释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

nong缩生物素化

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1zhi 120μL/70μL*

4/-20 #

生物素化稀释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nong缩HRP酶结he物

Concentrated HRP Conjugate

  1zhi 120μL/70μL*

4(避guang)

酶结he物稀释液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nong缩洗涤液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物rong液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避guang)

反ying终止液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

feng板覆膜

Plate Sealer

  5/3 *

 

说ming书

Product  Description

  1 

 

质检报告

Certificate of Analysis

  1 

 

特别说ming
*: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有物pin是fuqi全完整)
#: 
yi周内使觤ei纱嬗冱/span>4℃,xuchang时间存放或多次使用建议存于-20.                                      

大鼠甲胎蛋白(αFP)酶lian**吸附检ce试剂盒检ce前准beigong作:

1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平hengzhi室温。

2. 将nong缩洗涤液用shuang蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的nong缩洗涤液可能有结晶,属于正chang现象,可用40℃水浴微jiare使结晶完全rong解后zai配制洗涤液(jiare温du不要超过50℃,使用时洗涤液ying为室温)。当日使用。

3. 标准pin: 于10000×g离心1分钟,jiaru标准pin&yangpin稀释液1.0mLzhidong干标准pin中,旋紧管盖,jingzhi10分钟,上下颠倒数次,待qi充分rong解后,用移液器将qi轻轻混匀(nongdu为20ng/mL)。然后gen据xu要jin行倍眗en∈tingㄗⅲ翰灰苯釉诜磞ingkong中jin行倍眗en∈ting=ㄒ榕渲芻heng以下nongdu:按照稀释方fa图例 标准pin&yangpin稀释液直接作为空白kong0ng/mL。如配制5ng/mL标准pin:取0.5mL10ng/mL的上述标准pinjiaruhan有0.5mL标准pin&yangpin稀释液的EP管中,混匀即可,qi余nongdu襩ai薼ei推。 

4. 生物素化gong作液:实验前计算当次实验所xu用量(以100μL/kong计),实ji配制时ying多配制100-200μL。使用前15分钟,以生物素化稀释襤e∈蚽ong缩生物素化(1:100)chenggong作nongdu。当日使用。

5. 酶结he物gong作液:实验前计算当次实验所xu用量(以100μL/kong计),实ji配制时ying多配制100-200μL。使用前15分钟,以酶结he物稀释襤e∈蚽ong缩HRP酶结he物(1:100)chenggong作nongdu。

当日使用。

大鼠甲胎蛋白(αFP)酶lian**吸附检ce试剂盒标准pin稀释方fa图例:(以500μL/管为例,也可gen据实ji用量lai稀蕋ing?00μL/管)

1.使用前将所有的试剂he标ben缓慢均hengzhi室温(18-25oC),试剂不能直接在37oCrong解。

2.标准pin(dong干pin):mei瓶标准pinjiaru标准pin稀释液1mL,盖好后室温jingzhi大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以zhurong解,qinongdu为20ng/mL。准bei7个稀释标准pin的EP管,mei个EP管中jiaru500μL的标准pin稀释液,如图所示襩ai伪侗ren∈ting曜紁in稀释液(0pg/mL)直接作为空白kong。为保证实验结果有效xing,胟an问笛榍胧褂眯碌谋曜紁inrong液。

      

1. 在各kong中jiaru标准pin或yangpin各100μL, 37℃孵育90分钟

2. jiaru100μL 生物素化gong作液,37℃孵育60分钟

3. 洗涤3次

4. jiaru100μL酶结he物gong作液, 37℃孵育30分钟

5. 洗涤5次

6. jiaru90μL底物rong液, 37℃孵育15分钟左右

7. jiaru50μL终止液,立即在450nm波chang处ce量ODzhi

8. 结果计算

yi、操作yin素对ELISA结果的影响ELISA操作步骤复杂,操作瞙uai苯鸾洗蟮奈蟛睢R韵滦鹗龈鞲霾街柚械挠跋靬in素。

1.jiayang

2.温育

3.洗涤

4.显色

5.比色

二、灰区的设zhitongchangqing况下,ELISA定xing实验以“阳xing”he“阴xing”lai报告结果,两zhe间有yi条分界线被称为“阳xing判断zhi”(cut-off value,COzhi),这是定xing**ce定结果报告的依据。

三、标ben复查ELISA手gong检ce过程复杂,影响yin素较多,即使室内质kong在kong,也可能yinkong间差异er造cheng结果的差异,yin此jia大复查力du是保证结果准确xing祄u煽糠絝a,眗e缍訦BsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab祌en頼u祄u梢伞⑷跹魓ing标ben及少见模式的检ce结果jin行复查。

四、结果判断he报告chang用下列几种方fabiao示结果:

1.定xingce定

2.半定量ce定 结果yiban以滴dubiao示。

3.定量ce定 即用yi知量的标准pin作yi系列稀释后jin行ELISAce定,绘制标准曲线,结果以优良量或单weibiao示。在ELISA定羕ao靋e中meiyikuai反ying板du必须绘制xiangying的标准曲线。

大鼠甲胎蛋白(αFP)酶lian**吸附检ce试剂盒会出蟴hi奈侍饧敖饩霭靎a:

1. jiaru反ying终止液后,没有吸guangzhi或吸guangzhi偏低。

a.yuanyin:未jiaru酶标记物。

解决办fa:请按照操作步骤jin行。

b.yuanyin:试剂盒内容物未能充分回。

解决办fa:萬anㄊ约梁心谌菸锘匚潞髗aijin行操作。

c.yuanyin:室温tai低。

解决办fa:若室温tai低(<19℃),请于操作步骤4,适当延chang温育时间。

d.yuanyin:未使用试剂盒的清洗液清洗。

解决办fa: 请用试剂盒内所提gong的清洗液清洗。

e.yuanyin:试剂盒yi过有效qi限。

解决办fa:请更换cheng仍在有效qi限内的试剂盒。

2. 标准曲线线xing不jia,或是平行xing不好。

a.yuanyin:温育weizhi避guang不好或shou到气liu干扰。

解决办fa: 请确ren温育weizhi既不透guang也不透风(如抽ti内)。

b.yuanyin:操作时间拖taijiu。

解决办fa:请在方fa熟练后zaijin行操作。

c.yuanyin:微kong间xiang互污染。

解决办fa: jiayangpin时,请小心勿溅出微kong外,以免造chengqi它微kong的污染。

d.yuanyin:标准pin或酶标记物所jiaru的量不yizhi。

解决办fa:请使用yi校正过的移液qiang,bing确保qi与吸头之间有gaodu密hexing。

e.yuanyin:添jiayangpin或试剂的操作方fa不正确。

解决办fa:jiayangpin或试剂时,吸头请勿接触微kong。

f.yuanyine窗骞谭⑸侍?如管lu堵塞、洗完板后未立刻jin行下yi步骤)。

解决办fa:请sui时监kong洗板ji洗板过程,洗完后立即jin行下yi步骤。

3. 吸guangzhi均偏gao(或线xing不筯uan?。

a.yuanyin:室温taigao(>25℃)。

解决办fa: 若无fa降低室内温du,请适当缩短步骤4的温育时间。

b.yuanyin:底物rong液shou到污染。

解决办fa: 若发蟴hi孜飏ong液yi呈蟴hi渡氩灰獄ai使用。

c.yuanyin:反ying时间超过taijiu。

解决办fa:请kong謕in磞ing时间。

d.yuanyin:酶标记物污染了盒内qi它试剂。

解决办fa:使用过的吸头ying立即丢qi,可避免试剂间xiang互污染,凡是试剂(特别蕅iao副昙俏镉氲孜飏ong液)接触过的容器ying立即清洗干净。(先以漂白水浸pao,zai以清水冲洗干净,可确保无残留)

4. 阴xing标准pin的吸guangzhi低于阳xing标准pin的吸guangzhi。

a.yuanyin:微kong中的试剂未能充分混he。

解决办fa: 试剂jia完后,xu轻qiaopan四周使qi充分混he均匀。

b.yuanyine窗骞谭⑸侍?同2-f.)。

解决办fa:请参kao2-f.

c.yuanyin:添jiayangpin或酶标记物的量不yizhi。

解决办fa: 请参kao2-d.

注意shi项:

A 仔xi阅读说ming书。

B 检查试剂盒标签上的有效qi。如果超过有效qi,请勿使用。

C 按说ming书萬anㄋ惺约羜i全(数量、体积)。

D 标ben制bei要规fan,mei份标ben体积要按2-3个复kong以上的量制bei(贮存),尽量分装做bei份。短qi内无fa实验zhe,注意低温保存。

E 准bei好所有实验额外所xu物pin,(眗e缫埔浩鳎怨埽逑雌鳎副暌牵

F 按说ming书将所用试剂平hengzhi室温,gen据检ce标ben数量萬anㄋ鵻u试剂的量。

G 检查试剂盒内mei种试剂的贮存条件,保证所有试剂均按照试剂盒内说ming书推jian的条件存储。

H 检查不稳定或zhebian质的试剂rong液(眗e绯恋砘騜ian色)。有些试剂,眗e绫曜紁in稀释液或zhe检ce稀释液,可能在设计时jiuhan有沉淀物。所有试剂在滴ru酶标板之前,必xu充分混匀。eryou于沉淀物的特xing,在jiaru酶标板之前,必xu不ting搅拌。

I 保证充穤hi姆跤奔鋒e温du。

J 切勿使用不同生产批号的试剂取代现有试剂或混he现有试剂。

K 在混he或rong解蛋白rong液时,避免pao沫产生。

L 在实验开始之前,安排好实验liu程。

M 在实验开始之前,清洁gong作台。

N 若有问题,ying与我gong司或代lishang的糺i鮶hi持lian系

大鼠甲胎蛋白(αFP)酶lian**吸附检ce试剂盒结果判断:

1. mei个标准pin的ODzhi减去空白kong的ODzhi后作图,如设zhi复kong,则ying取qi平均zhi计算。以标准pin的nongdu为heng坐标,ODzhi为纵坐标,绘出标准曲线。亦可以ODzhi为heng坐标,标准pin的nongdu为纵坐标,绘出标准曲线。

2. 推jian使用专业的曲线制作软件,如curve expert 1.3或1.4,在软件界面既可gen据yangpinODzhi,you标准曲线查出xiangying的nongdu,乘以稀释倍数;亦可将yangpin的ODzhi代ru标准曲线的拟he方程式,计算出yangpinnongdu,zai乘以稀释倍数,即为yangpin的实jinongdu。

3. 若yangpinODzhigao于标准曲线上限,ying适当稀释后zhongce,计算nongdu时ying乘以稀释倍数。

 特异xing:

ben试剂盒用于检ce大鼠甲胎蛋白(αFP),经检ce与qi它xiang似物质无ming显交cha反ying。

you于shou到糺i跫皔angbenlai源的限制,不可能完cheng对所有xiang关或xiang似物质交cha反ying检ce,yin此ben试剂盒有可能与未经检ce的qi它物质有交cha反ying。

回shou率:

分别于定zhi血清及血浆yangben中jiaruyi定量的大鼠甲胎蛋白(αFP)(jia标yangpin),zhong复ce定bing计算qi均zhi,回shou率为ce定zhi与li论zhi的比率

线xing:

在定zhi血清及血浆yangben内jiaru适量的大鼠甲胎蛋白(αFP),bing倍眗en∈蚦heng 1:21:41:81:16 的待ceyangben,线xingfan围即为稀释后yangben中大鼠甲胎蛋白(αFP)han量的ce定zhi与li论zhi的比率。


大鼠甲胎蛋白(αFP)酶lian**吸附检ce试剂盒精密du:

精密du用yangpince定zhi的bian异系数 CV biao示。CV(%) = SD/mean×100

批内差:取同批次试剂盒对低、中、gaozhi定zhiyangbenjin行定羕ao靋e,mei份yangbenlianxuce定 20 次,分别计算不同nongduyangben的平均zhi及 SD zhi。

批间差:选取 3 个不同批次的试剂盒分别对低、中、gaozhi定zhiyangbenjin行定量ce定,mei个yangben使用同yi试剂盒zhong复

ce定 8 次,分别计算不同nongduyangben的平均zhi及 SD zhi。

批内差: CV<10%

批间差: CV<12%

稳定xing:

经ce定,试剂簒ing谟行i内按推jian温du保存,qi活xing降低率小于 5%

为减小外部yin素对试剂盒破huai前后检cezhi的影响,实验室的环境条件xu尽量保持yizhi,尤qi是实验室内温du、湿du及温育条件。qi次you同yi实验员laijin行操作可减少人为误差。


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